骨组织脱钙

　　骨组织(osseous tissue)是一种坚硬的结缔组织，与其他结缔组织基本相似，也是由细胞、纤维和基质构成的。但骨的最大特点是细胞基质具有大量的钙盐沉积，成为很坚硬的组织。由于骨组织里有钙盐，影响常规石蜡切片制作，因此骨组织及钙化病灶固定后，需先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。若脱钙不充分，则切片易碎裂，并损伤切片及刀刃，脱去钙盐的过程即脱钙。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid EDTA)除此之外还有电解脱钙法。

　　一、注意事项

　　1、脱钙时间应根据所用的脱钙剂不同种类，不同骨组织、骨密质、骨松质和组织块的大小等具体情况来确定脱钙时间。

　　2、骨组织取材不宜过厚，一般应在5 mm左右，以免脱钙时间过长造成组织形态结构破坏和染色效果不佳。

　　3、脱钙容器不能使用金属制品，而且脱钙液的用量要充足，一般为标本的20-30倍，其中更换新液1-2次。

　　4、骨组织一般应先固定后脱钙，或脱钙固定同时进行，未经固定的骨组织不宜脱钙，且脱钙液也不宜加温。

　　脱钙液选择建议：

　　若骨组织后续要做免疫组化，建议选择EDTA脱钙液，脱钙速度相对长些;若骨组织后续仅做HE染色，则可选择甲酸方法脱钙，速度快，而且对组织结构影响极小。

　　二、操作说明

　　1、取材：样本如股骨头、牙齿、病变骨、碎骨组织等，针对不同的样本采用骨钳或骨锯将其锯成厚度不超过0.5 cm的骨片，剥去骨组织周围的软组织。

　　2、固定：将处理好的骨片放入固定液中固定12-24 h。

　　3、脱钙：样本固定好之后，将其放入脱钙液中脱钙一定时间，时间依据脱钙液和标本而定。

　　4、脱钙结束： 用细针轻刺可进入而不感到阻力，判定脱钙结束。脱钙后的组织经流水冲洗后，行常规石蜡切片。