一、Western Blot 检测
蛋白质印迹法(免疫印迹实验)即Western Blot。Western Blot 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
二、实验操作流程
1、样品蛋白的抽提与定量;
2、预实验:电泳,转膜,封闭,抗体孵育及显色
3、确认最佳上样量及抗体稀释比例
4、正式实验:电泳,转膜,封闭,抗体孵育及显色
5、图像分析及数据处理
三、实验结果提供
1、Western blot蛋白质浓度及电泳上样量;
2、原始图片、图片分析结果;
3、Western blot完整的实验报告,包括目的条带灰度分析结果、详细的实验步骤、使用仪器和试剂等。
四、客户提供
新鲜且足量的样品(组织不少于50 mg,细胞不少于106),或提取的总蛋白(≥ 50 μl)。
备注:客户提供检测目的蛋白的有效一抗(若无一抗,本公司可代购)。
五、运输要求:
1.细胞样品:收集细胞后放入液氮中速冻保存或速冻24 h后转入-80 °C冰箱保存。
2.组织样品:动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存,液氮冻存24 h后可转入-80 °C冰箱保存。
3.特殊样本:全血采用冰袋维持4℃运输,严禁用干冰和液氮运输,血清和血浆可采用液氮,干冰,冰袋运输。植物组织应采用干冰或液氮运输,防止植物褐化,氧化。
4.已经变性的样本:液氮、干冰、均可运输
备注:所有样品的处理和保存过程中,切忌反复冻融。 外地可干冰包装寄送,上海本地客户可上门收样。