细胞划痕实验完全指南：揭秘细胞自愈的分子奇迹

✦ 细胞划痕实验 ✦

主要用于评估贴壁细胞在体外的迁移能力，其核心应用包括：

肿瘤转移研究：通过观察癌细胞的迁移速度，评估其侵袭与转移潜能。

药物干预评估：快速筛选抑制或促进细胞迁移的化合物，为抗癌药物和创伤修复药物的开发提供关键依据。

再生医学研究：揭示干细胞或无痕修复过程中细胞迁移的机制。

✦ 细胞培养与铺板 ✦

选取处于对数生长期的细胞，以70–90%密度接种于6孔板或24孔板。

在37℃、5% CO₂培养箱中过夜培养，待细胞完全贴壁后进行后续操作。

✦ 划痕制作 ✦

使用无菌的10 µL或200 µL移液器枪头，垂直于孔板底部，以一致的速度和力度划出直线（建议每孔至少3条平行线）。

注意避免损伤孔板底部或反复刮擦。

✦ 清洗与处理 ✦

使用预温的PBS或新鲜培养基轻柔冲洗2–3次，去除因划痕脱落的细胞和碎片。

如研究药物或基因干预效果，可在清洗后加入含处理因子的新鲜培养基。

✦ 图像记录 ✦

在倒置显微镜下拍摄初始（0小时）划痕图像。

按预设时间点（如6、12、24小时）再次拍摄同一位置，记录划痕闭合过程。

✦ 数据分析 ✦

使用ImageJ、TScratch等软件测量各时间点的划痕面积。

按以下公式计算细胞迁移率：

迁移率 = (初始划痕宽度 – t时刻划痕宽度) / 初始划痕宽度 × 100%

✦ 其他关键注意事项 ✦

设置对照：包括高迁移能力细胞的阳性对照和使用迁移抑制剂的阴性对照。

边缘效应处理：划痕后静置培养板1–2小时再观察，减少机械干扰。

细胞类型适配：对迁移缓慢的细胞（如成纤维细胞），可延长观察时间至48小时。

通过系统掌握细胞划痕实验的设计、执行与分析要点，研究人员能够更准确地揭示细胞迁移的机制，为药物研发与再生医学研究提供可靠的数据支持。

✦ BiotechDX ✦

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