动物模型构建丨TNBS诱导的大鼠结肠炎模型

炎症性肠病（IBD）如溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD），是一类病因复杂、病程迁延不愈的肠道慢性炎症性疾病，给患者带来巨大痛苦，且目前无法根治。IBD的发病机制尚未完全阐明，但主流的“三要素”学说认为，它是在遗传易感个体中，由于肠道微生物群的异常刺激，导致肠道黏膜免疫系统过度激活且调节失衡，从而引发难以自行消退的慢性炎症。

为了深入理解IBD的发病机理并研发有效的治疗药物，研究人员必须在实验室中构建能够模拟人类疾病关键特征的动物模型。在众多模型中，三硝基苯磺酸钠（TNBS）诱导的大鼠结肠炎模型被国际公认为一个经典且高效的实验工具。

该模型通过直肠内灌注TNBS的乙醇溶液，在大鼠体内成功模拟了人类炎症性肠病（IBD）的病理特征。其核心机制是半抗原化效应：TNBS作为半抗原与肠道自身蛋白结合，引发针对肠道组织的Th1和Th17型主导的免疫反应，导致慢性、非特异性炎症。

主要应用：用于结肠炎药物的疗效评估和发病机理（特别是免疫机制）的研究。

TNBS诱导大鼠结肠炎模型

实验方案核心要点

动物：SPF级SD大鼠，雄性，6-8周龄，体重180-200g。

实验分组：正常对照组、模型组、给药组

实验周期：4–6周

建模试剂：5% TNBS溶液与无水乙醇按体积比2:1混合（即最终为含约3.3% TNBS的50%乙醇溶液）。

建模步骤：

禁食24小时（不禁水）。
异氟烷吸入麻醉。
经肛门插入导管约8cm。
注入200μl TNBS/乙醇溶液（对照组注入等量PBS）。
倒置大鼠3分钟，防止液体流出。

TNBS诱导大鼠结肠炎模型

模型验证与结果

模型成功建立，并呈现出典型的、随时间演进的病理和免疫学变化。

疾病活动指数

体重：是评估疾病严重程度的关键指标，模型组大鼠体重通常会显著下降或增长缓慢。实验期间需定期（如每3天）称重并绘制变化曲线。

宏观（大体）损伤

时间点：造模后第3天即可见异常，第6天加重。

表现：肠黏膜充血、水肿、肠壁增厚、溃疡。

评分标准

（0-5分）

0分：无损伤

1分：充血无溃疡

2分：充血且肠壁变厚

3分：一处小溃疡（0-1cm）

4分：溃疡较大（1-2cm）

5分：溃疡很大（>2cm）

结肠长度：炎症通常导致结肠缩短，测量结肠长度是另一个重要的大体评价指标。

组织病理学损伤

HE染色：显示结肠组织有炎性细胞浸润、组织水肿、结构破坏等。

病理评分：对HE染色切片进行专门的病理学评分，量化组织损伤程度。

“瑞士卷”包埋技术：将结肠组织卷起包埋，便于在一张切片上观察整个肠段的病理变化，提高评估的全面性和准确性。

免疫应答动态变化（核心发现）

模型揭示了IBD中T细胞亚群及其细胞因子的时序性变化，这是该模型用于机理研究的价值所在。

早期阶段（造模第3天）：Th17应答主导

Th17相关因子（IL-17, IL-21, IL-23）及其关键转录因子RORγt的mRNA水平显著上调。

表明早期炎症主要由Th17细胞驱动。

中后期阶段（造模第6天）：Th1/Treg应答激活

Th1类因子（IL-2, IFN-γ, IL-12p40）mRNA水平显著上调，免疫应答向Th1型偏移。

Treg相关因子IL-10的mRNA水平也上调，表明机体同时启动了抗炎/调节机制。

Th17相关因子水平虽较第3天有所下降，但仍高于正常水平，说明炎症持续存在。

样本采集与检测指标总结

检测时间	样本类型	检测方法	主要检测指标/目的
实验过程中	动物整体	临床观察、称重	死亡率、疾病症状、体重变化曲线
终点（安乐死后）	结肠组织	大体观察、带标尺拍照	大体损伤评分、结肠长度测量
终点	结肠组织	石蜡切片、HE染色	组织病理学评分、炎症细胞浸润观察
终点	结肠组织/肠系膜淋巴结	Real-time PCR	Th17相关：IL-17, IL-21, IL-23, RORγt Th1相关：IFN-γ, IL-2, IL-12p40 Treg相关：IL-10
终点（如第27天）	血清	ELISA	促炎因子：TNF-α 抗炎因子：IL-10

代轩生物TNBS诱导

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代轩生物依托成熟的动物模型构建平台和丰富的病理机制研究经验，为客户提供标准化、高质量的TNBS诱导的大鼠结肠炎模型构建服务。

代轩生物

服务优势

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BiotechDX

我们通过直肠灌注TNBS-乙醇溶液，在半抗原效应和化学刺激的协同作用下，在大鼠体内稳定诱导出以Th1/Th17免疫应答为主导的慢性结肠炎。该模型能高度模拟人类IBD的免疫失调、慢性炎症及组织病理损伤等核心特征。

模型稳定可靠

采用SPF级动物和标准化的操作流程（如禁食、麻醉、灌肠深度、倒置时间），确保模型成功率和均一性，保证实验结果的可重复性。

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不仅提供模型构建，更提供从宏观到微观、从组织到分子的全方位、多层次的表型验证，为您的研究提供坚实的数据支持。

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采用经典的 “瑞士卷”包埋技术，确保能对整段结肠进行无遗漏的病理观察，并提供专业的大体损伤评分和组织病理学评分。

灵活的定制服务

可以根据研究需要，选择不同的建模周期、检测时间点，或增加特定的分子生物学检测指标。

我们的技术团队将根据您的具体研究目标和预算，为您量身定制最合适的实验方案，助您的研究取得成功。

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