从行为到情绪：高架十字迷宫实验设计与应用

• 装置准备

结构：十字形，含两个开放臂（无侧壁）、两个闭合臂（有高侧壁）和一个中央区。

材质：无毒塑料或有机玻璃。

架高：距地面50-70厘米，以减少地面干扰并引发适度恐惧。

清洁：每只动物测试后，必须用75%酒精等无刺激性消毒剂彻底擦拭，待气味完全挥发后再进行下一只测试。

• 动物准备

品系与年龄：常用健康成年SPF级动物（如C57BL/6小鼠，SD/Wistar大鼠），通常6-8周龄。

性别：同一实验需统一性别，因性激素对焦虑行为有显著影响。若研究性别差异，则需单独设计分组。

适应：实验前至少1周，将动物置于与测试室环境（温度22±2°C，湿度50±5%，12小时光暗循环）一致的饲养室中适应。测试前30-60分钟，需将动物单只转移至测试室旁的透明适应盒中，让其适应测试室的声、光、气味。

• 放置动物

实验者佩戴手套，轻柔地抓取动物背部或躯干，避免抓尾或腹部。

将动物置于迷宫中央区，身体朝向其中一个闭合臂（统一朝向以减少差异）。

确保动物四肢稳定后，实验者迅速、安静地退出测试区，启动摄像和计时（通常测试5分钟）。

• 观察与记录

测试期间，实验者严禁发出声响或干扰动物，应通过视频监控观察。

采用 “盲法” 操作（即实验者不知动物分组情况）是减少主观偏差的黄金标准。

• 结束与转移

5分钟结束后，轻柔地从动物所在的臂（通常是闭合臂）抓取动物，放回清洁饲养盒。

关键：在清洁迷宫并等待气味消散期间，动物应在测试室外的适应盒中等待，避免被下一只动物的气味干扰。

• 核心焦虑指标

开放臂进入次数百分比（OE%）：OE% = (进入开放臂次数 / 进入所有臂总次数) × 100%

开放臂停留时间百分比（OT%）：OT% = (在开放臂停留时间 / 在所有臂停留总时间) × 100%

解读：焦虑水平越高，OE%和OT% 越低。

• 活动度对照指标

总臂进入次数（TE）：反映动物的整体活动水平和探索动机。

解读：若TE过低（如<3次），可能表示动物活动抑制（如抑郁或过度应激），该数据应被排除，否则会影响焦虑指标的解释。

• 其他辅助指标

中央区停留时间（过长可能表示决策困难或过度警觉）。

理毛次数（应激或安抚行为）。

探头次数、站立次数等。

• 环境控制

噪音：必须绝对安静。任何突然的声响都会导致假阴性（动物乱跑）或假阳性（动物僵直）。

光照：均匀、柔和、稳定。建议在动物活动活跃的暗周期初期进行测试（啮齿类为夜行动物），结果更稳定。

气味：除清洁迷宫外，测试室本身应无异味。酒精味过浓也会干扰行为。

• 数据有效性判断

必须排除的数据：

总臂进入次数（TE）< 3次

长时间（>3分钟）停留在中央区不进入任何臂。

出现攀爬、跳跃逃逸、腹泻、抽搐等异常行为。

• 操作与分析的严谨性

盲法优先：从测试到初步行为记录，尽量保证操作者不知分组。

自动化分析：推荐使用EthoVision、ANY-maze等视频跟踪软件，客观、高效。

人工核对：若人工计分，需由两名独立观察者进行，并计算评分者间信度（Kappa值 > 0.8）。

高架十字迷宫实验的成功，30%在于精妙的实验设计，70%在于极致的标准化操作和细节控制。它不仅是评估焦虑的工具，更是理解动物在冲突情境下决策行为的窗口。严格遵循上述规程，才能获得可靠、可重复的数据，从而为情绪神经科学的深入研究奠定坚实基础。

代轩生物动物行为学服务平台致力于为神经科学、药理学、毒理学及精神疾病研究领域提供专业、精准、可重复的行为学检测服务。我们拥有国际标准的实验动物设施和全自动行为分析系统，配备经验丰富的技术团队，可提供从实验设计到数据分析的全流程解决方案。

技术创新与服务特色

• 智能化分析平台

AI行为识别系统：基于深度学习算法，实现对20余种精细行为的自动化分类与多动物同步追踪，准确率>98%

多维数据分析模块：提供轨迹复杂度、行为序列、主成分聚类等高级分析，兼容主流统计软件

• 标准化质控体系

全流程SOP管理：每项实验均配备标准化操作程序，确保跨批次数据一致性

三重质量监督：实施设备定期校准、人员资质认证、实验过程盲法操作

环境精准控制：实时监控测试环境参数（温湿度、光照、噪音），数据全程可追溯

• 定制化实验设计

预实验咨询服务：协助优化检测组合、样本量计算及对照设置

灵活方案配置：支持昼夜双周期测试、多强度刺激梯度、疾病模型专用方案

• 一体化报告输出

可视化数据报告：含轨迹热图、行为谱图、统计图表及视频摘要

原始数据开放：提供标准化数据包，支持客户自主深度分析

• 应用领域

神经退行性疾病：阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病动物模型评估

精神疾病研究：抑郁症、焦虑症、精神分裂症、自闭症模型验证

药物开发：神经系统药物药效评价、安全性药理检测

基因功能研究：转基因/基因敲除动物的行为表型分析

毒理学评估：神经毒性、发育神经毒性行为学终点检测

康复医学研究：神经损伤后功能恢复评估

• 项目周期与服务流程

需求咨询（1-3个工作日）：明确研究目的，确定检测方案

方案制定（3-5个工作日）：提供详细实验方案和报价

动物准备（1-2周）：动物订购、适应、分组标记

行为测试（根据方案）：按时间线开展实验

数据分析（1-2周）：完成数据整理和统计分析

报告交付（1周）：提供完整实验报告和原始数据

代轩生物以严谨的科学态度、专业的技术能力和完善的质量体系，为每一位客户提供可靠的动物行为学数据支撑，助力您的科学研究与药物开发项目。