告别标记物混乱!流式免疫细胞全表整理·人鼠对照版
流式细胞术作为免疫学研究的关键技术,通过对细胞表面及胞内标记物的多参数分析,实现对免疫细胞的高通量、单细胞水平鉴定与功能解析。然而,免疫细胞具有高度异质性(如T细胞亚群、髓系细胞分化谱系)和动态性(活化/耗竭状态转变),且人源与小鼠模型间存在显著种属差异(如NK细胞标记NK1.1 vs. CD56)。这些复杂性使得研究者需系统整合细胞定义、标记物组合及圈门策略,才能精准识别目标群体。
本文系统汇总流式常用免疫细胞及标记物,实验必备速查指南,建议收藏备用!
关键补充说明
SUPPLEMENT
细胞类型 |
标记物与操作要求 |
注意事项 |
---|---|---|
红细胞 |
人:CD235a⁺ |
必须裂解红细胞(避免信号干扰) |
血小板 |
CD41⁺/CD61⁺(整合素αIIbβ3) |
防聚集:EDTA抗凝 + 轻柔处理 |
检测难点 |
解决方案 |
激活标记 |
---|---|---|
体积巨大(50-100μm) |
调整FSC电压/使用特殊缓冲液 |
CD62P⁺(P-选择素) |
易堵塞流式细胞仪管路 |
降低进样流速 + 预过滤样本 |
_ |
种属 |
中性粒细胞 |
嗜酸性粒细胞 |
嗜碱性粒细胞 |
---|---|---|---|
人 |
CD16⁺/CD66b⁺ |
CCR3⁺/Siglec-8⁺ |
CD123⁺/FcεRI⁺ |
小鼠 |
Ly6G⁺ |
Siglec-F⁺ |
FcεRI⁺/CD200R3⁺ |
种属 |
核心标记 |
品系注意事项 |
---|---|---|
人 |
CD3⁺/CD161⁺ |
需联合TCR与NK受体检测 |
小鼠 |
CD3⁺/NK1.1⁺ |
BALB/c等品系改用 CD49b⁺(DX5)替代NK1.1 |
细胞类型 |
状态 |
标记物组合 |
---|---|---|
T细胞 |
耗竭 |
PD-1⁺/TIM-3⁺/LAG-3⁺ |
巨噬细胞 |
M1型 |
CD80⁺/CD86⁺ |
_ |
M2型 |
CD163⁺/CD206⁺ |
检测类型 |
关键步骤 |
典型案例 |
---|---|---|
胞内标记 |
需固定破膜 |
FoxP3⁺/Ki-67⁺/细胞因子(IFN-γ/IL-4) |
稀有细胞 |
需预富集或提高事件量 |
巨核细胞:CD41⁺/CD42⁺ |
跨物种标记 |
验证种属特异性 |
人CD16=FcγRIII,小鼠CD16=NK细胞标记 |